本项成果主要包含如下三方面研究内容:
(1)纳米丝网的制备表征及其对血管内皮屏障形成的影响机制研究
研究了纳米丝网、纳米纤维膜和商品PC膜三类屏障膜材料的制备与表征、内皮细胞在膜材料上的形态与增殖研究和细胞-细胞/细胞-基底相互作用研究三个方面研究对比血管内皮细胞在PC膜、传统多层纳米纤维膜和不同密度的纳米丝网基底膜作为体外仿生基底膜在屏障模型构建中的机制和差异。
(2)基于纳米丝网组装技术的静态屏障模型构建研究
完成了基于纳米丝网的血管内皮屏障和气-血屏障模型的构建,并通过活细胞追踪染色、激光共聚焦三维表征等手段验证了屏障模型的成功构建,并通过荧光分子渗透和跨膜电阻测试两种方式对模型的屏障功能进行了评价。
(3)动态屏障模型的构建及其屏障功能评价研究
将基于纳米丝网所构建的血管内皮屏障集成于微流控心脏芯片中实现了屏障的动态培养,对静态和动态屏障模型的细胞活性、取向、紧密连接等进行了对比研究,并结合不同分子量荧光分子渗透、TEER分析等技术对动态环境下和静态环境下屏障功能的差异进行了对比研究。并在此基础上利用所构建的血管-心脏芯片模型实现了药物心脏响应评价,揭示了体外药筛模型中血管内皮屏障的重要性。 |