| 雄激素及其受体(AR)在精子发生过程中具有非常重要的作用，但其分子机制尚未完全明了。我们前期研究发现，睾酮可以诱导睾丸支持细胞胞质中AR快速向细胞膜转运，且睾酮诱导的磷酸化信号级联反应介导AR的转运。我们采用蛋白质谱鉴定了参与AR转运的候选蛋白CSN6，CSN6是磷酸化信号通路的重要调节元件。因此，我们提出假说，CSN6介导的磷酸化信号通路参与调控雄激素的非经典途径。本项目的实施，将进一步丰富雄激素“非经典信号通路”的科学内涵，对于阐明精子发生的分子机制具有重要的学术意义，也将为生精障碍的诊断和治疗提供新的思路。
我们建立并优化了小鼠睾丸支持细胞的分离和培养方法，发现睾酮诱导的磷酸化信号级联反应介导雄激素受体（AR）向细胞膜转运。我们联合质谱分析、IP 和蛋白免疫印迹实验验证，表明CSN6可能参与AR向细胞膜的转运。进一步研究结果显示，CSN6通过Mek/Erk和Akt磷酸化信号通路介导了受体的细胞内转运。通过敲减CSN6，抑制Mek/Erk及Akt激酶磷酸化，鉴定了CSN6介导磷酸化信号通路的上下游激酶，进一步解析了CSN6介导的磷酸化信号通路的激活的分子机制。相关的论文发表在Cellular Physiology and Biochemistry期刊。同时，项目采用ChIP-seq筛选睾丸支持细胞AR的靶基因，发现了8679个差异表达基因，其中4830个表达上调，3849个表达下调。后续鉴定了两个重要靶基因PMCA4和PEBP本项目是建立在前期良好的基础上，进一步研究雄激素受体介导的雄激素作用的非经典途径。本研究鉴定了CSN6为参与雄激素受体非经典途径的候选蛋白。本项目研究雄激素受体介导的非经典途径在精子发生过程的作用。
项目主要研究成果包括：（1）建立并优化了小鼠睾丸支持细胞的分离和培养方法；（2）睾酮诱导的磷酸化信号级联反应介导AR向细胞膜转运；（3）鉴定CSN6为参与AR转运的候选蛋白；（4）CSN6 通过Mek/Erk和Akt磷酸化信号通路介导AR 的转运。
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