2：项目研究目的与意义：本项目在前期已有的研究基础上，与美国密苏里大学合作，建立了膀胱癌动物模型，应用CpG-ODN配合化疗药进行膀胱癌灌注治疗，对CpG-ODN增强膀胱癌化疗作用的临床前研究，开发一种新型膀胱癌辅助治疗的候选生物药物。

     3：主要研究结果：体外培养人膀胱癌UM-UC-3细胞、人膀胱癌T24细胞、肝癌细胞HepG2细胞、胃癌SGC-7901细胞、肠癌LS174T、SKOV3细胞进行细胞杀伤相关机制研究，以卡介苗为对照，以表柔比星为化疗药物，研究了肿瘤细胞caspse-3、p53、Bax、Bcl-2的表达水平。 探讨了特异性CpG-ODN对人膀胱癌细胞的作用的分子机制，CpG ODN通过增强caspase-3、p53和Bax的表达，抑制Bcl-2的表达，诱导人膀胱癌细胞凋亡。

    通过膀胱灌注诱导剂MNU建立膀胱癌模型大鼠，以EPI化疗药物，研究了膀胱组织治疗前后生物学特征的变化，HE染色法观察病理组织的变化，免疫组化法检测p53、survivin蛋白的表达水平以及血清中IL-2、IFN-γ表达水平，研究了CpG-ODN对化疗药物EPI的免疫增敏作用。对比分析CpG-ODN、卡介苗对膀胱肿瘤的疗效、使用剂量、产生的副作用，研究了CpG-ODN替代BCG的可能性。  

  确定并建立了116只SD大鼠膀胱癌模型，膀胱肿瘤大鼠建模成功率达77.8 %。CpG-ODN联合EPI更能有效抑制肿瘤的发展，可作为EPI的抗肿瘤增敏剂；CpG-ODN能够有效的刺激细胞免疫反应，活化免疫细胞并产生稳定量的细胞因子IL-2、IFN-γ；CpG-ODN能显著下调p53、survivin蛋白的表达水平；CpG-ODN作为化疗药增敏剂时，使用剂量远低于BCG，且抗肿瘤作用更稳定，更安全。

   4：创新点：通过细胞生物学、分子生物学、免疫学和药学技术方法，确定了CpG-ODN有效范围是0.1 μM至10 μM，实验动物模型使用剂量为4 μM；研究了CpG-ODN对caspase-3、p53、Bax和Bcl-2等表达的影响；成功构建大鼠膀胱癌实验动物模型，研究了实验动物IL-2、IFN-γ、p53、survivin蛋白的表达，通过免疫组化技术，研究了CpG-ODN增强化疗药治疗膀胱癌的作用，与卡介苗相比较，具有较好的优势；确定了CpG-ODN最适的治疗剂量为4 μM，建立了CpG-ODN膀胱癌灌注的方法，为临床操作规范的制订打下实验基础。

    项目执行时间有所调整，增加了一些必要的研究内容，课题组发表学术论文6篇，其中SCI论文3篇，申请发明专利1项，培养4名硕士研究生。